产品简介

Microscoop® Mint是一款突破性的空间蛋白质组学平台，已被用于揭示许多生物学问题中感兴趣的特定细胞/亚细胞区域内新的蛋白质组成。Microscoop® Mint执行显微“挖掘”操作，即通过自动化的双光子激光引导的光生物素化标记，以对AI圈选的目标区域内足够多的细胞/亚细胞蛋白质进行光标记和分离/采集，然后通过质谱检测实现空间蛋白质组学新的发现。这是一种前所未有的空间捕获技术，能够在高分辨率、高灵敏度和高特异性下实现无偏的细胞/亚细胞蛋白质组鉴定，并能够从目标区域中准确发现新的蛋白质成分。

产品工作流程

1、第1步：实时图像分析：向样本中加入光标记试剂（Synlight-Rich^TM或Synlight-Pure^TM）进行孵育；对样本进行成像（可实现多个颜色成像），用AutoscoopTM软件进行实时分析，结合AI技术圈选感兴趣区域。

2、第2步：光生物素化标记：双光子激光受控制的在感兴趣的区域内进行逐个视野地扫射；通过激活光标记试剂（Synlight-Rich^TM或Synlight-Pure^TM）中可活化的生物素标签，实现空间定位精准的蛋白质光生物素化标记；该光标记过程会自动在数千个视野范围内重复进行，以确保有足够数量的蛋白质被生物素标记，用于后续基于质谱技术的蛋白质组学分析。

3、第3步：蛋白质提取：收集样品组织，使用蛋白提取试剂（Synpull^TM）处理，以裂解样品，通过链霉亲和素磁珠免疫沉淀富集光标记的蛋白，并将其消化为肽段用于后续质谱检测。

4、第4步：蛋白质组鉴定：收集的肽段被送入质谱仪进行 LC-MS/MS 分析；通过对比光标记组和对照组的蛋白质，可高灵敏度、高特异性、高空间精度地获得目标区域的特异性蛋白质组信息；后续可通过免疫染色共定位或附加功能实验进行蛋白质的验证。可实现纳米分辨率的无偏的细胞/亚细胞空间蛋白质组鉴定，并能够从目标区域中准确发现新的蛋白质成分。

产品特点

1、无偏的蛋白质组鉴定：无需事先设计检测panel即可鉴定蛋白质组；

2、可发现高特异性的新的蛋白质成分：质谱检测可发现新成分；

3、高分辨率标记：光生物素标记的精度达到25nm，可标记亚细胞蛋白质，匹配蛋白质的空间信息；

4、高检测灵敏度：高动态范围，可发现低拷贝数蛋白质；

5、广泛的样本兼容性：适用于FFPE、新鲜冰冻组织、固定冰冻组织、固定细胞等组织和细胞样本；

6、无需进行分子修饰，在原始的细胞或组织环境中进行空间蛋白质组检测。

应用概述

Microscoop Mint可用于广泛的研究领域，包括：神经科学、癌症生物学、细胞生物学、免疫学、发育生物学、传染病、衰老、代谢性疾病、炎症性疾病、干细胞研究、免疫肿瘤学、病理学、药物靶点发现、生物标志物发现等领域。

1、神经科学

显微镜可识别的结构，如β淀粉样蛋白、内侧内嗅皮层 II 层中 reelin 阳性神经元或树突棘等，可通过Microscoop® 实现的空间富集技术进行研究。以下是海马齿状回苔藓纤维末梢的一个示例，通过Microscoop®（Alexa488- 中性链霉亲和素，绿色）进行光生物素标记，用于后续蛋白质提取及蛋白质组发现研究。

2、癌症生物学

通过 Microscoop® 实现的空间富集技术以及后续的蛋白质组学分析，可以解决诸如识别转移细胞的E- 钙粘蛋白相关蛋白、癌细胞与 T 细胞界面处的蛋白，以及三阴性乳腺癌中 Ki67+ 细胞的蛋白质组等问题。以下是一个早期癌症标志物角蛋白 19 细胞在小鼠胰腺癌病灶周围分布的示例。

3、细胞生物学

利用 Microscoop® 和质谱技术可以鉴定细胞器等亚细胞结构的蛋白质组，例如较大的细胞外囊泡、应激颗粒、丝状伪足尖端、局灶性粘附或内质网 - 线粒体接触位点。此处展示了一个例子：过氧化物酶体（PEX14，绿色），可通过 Microscoop® 进行光生物素化标记，用于亚细胞空间捕获和蛋白质组学分析。

4、代谢生物学

利用 Microscoop® 技术进行蛋白质组学发现还可以应用于免疫学、代谢疾病、发育生物学、传染病等其他生物学问题的研究。这是一张胰岛的图像，可以从中分离出α细胞（胰高血糖素，绿色）、β细胞（胰岛素，白色）或血管（WGA，红色），并鉴定新的蛋白质成分。